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Pompe d'injection Cat 3406b

Pompe d'injection Cat 3406b



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Pompe d'injection Cat 3406b. La concentration a été ajustée à 10^8^ CFU/mL dans du PBS contenant 0,5% de BSA. Les souris ont été infectées avec *C. glabrata* par inoculation intraveineuse à 0,3 ,mL/par souris via la veine caudale.

Traitement {#S0002-S2011}

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La souris a reçu une injection sous-cutanée de 100 ,mg/kg/jour de nal-CRO ou nal-PEN, ou 5 ,mg/kg/jour de caspofungine, ou 5 ,mg/kg/jour de fluconazole, ou 50 ,mg/kg /jour de terbinafine, ou 30 ,mg/kg/jour d'isavuconazonium, ou 30 ,mg/kg/jour de micafungine ou un volume égal de PBS comme contrôle, 1 ,h avant *C. défi glabrata*. La souris a reçu une injection de *C. glabrata* par inoculation intraveineuse à 0,3 ,mL/par souris via la veine caudale.

PCR quantitative en temps réel {#S0002-S2012}

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Des tissus cérébraux de souris ou des tissus pulmonaires ont été homogénéisés dans du tampon RLT Plus du kit RNeasy Plus Mini (Qiagen, Hilden, Allemagne). L'ARN total a été extrait et l'ADNc a été synthétisé en utilisant un kit de réactif PrimeScript RT (TaKaRa, Dalian, Chine) comme décrit précédemment [[18](#CIT0018)]. L'expression de l'IL-1β, du TNFα, de l'IFNγ, de l'IL-6 et de la GAPDH a été mesurée par un test PCR quantitatif en temps réel avec un SYBR Green Master Mix (TaKaRa) comme décrit précédemment [[18](#CIT0018)] .

Western blot {#S0002-S2013}

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Les tissus cérébraux de souris ont été lysés dans du tampon RIPA. Les lysats ont été collectés et analysés comme décrit précédemment [[19](#CIT0019)]. Les anticorps primaires suivants ont été utilisés : anti-GAPDH monoclonal de souris, anti-ASC (1:1000, ab109213), anti-caspase-1 (1:500, ab1872), anti-caspase-1 clivée (1:1000, ab1872) , anti-IL-1β, anti-IL-6 (1:500, ab100712) et anti-TNFα (1:500, ab6671) (Abcam, Cambridge, MA), anti-NLRP3 monoclonal de lapin (1:500, ab208294 ), anti-caspase-1 (1:500, ab13847) et anti-IL-1β (1:500, ab9787) (Abcam), anti-ASC monoclonal de lapin (1:1000, sc-22514-R) (Santa Cruz Biotechnology, CA) et anti-GAPDH polyclonal de lapin (1:1000, ab8245) (Abcam). Les niveaux d'expression des protéines ont été normalisés à GAPDH.

Survie des souris {#S0002-S2014}

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Les souris ont reçu un volume égal de PBS comme contrôle, 100 ,mg/kg/jour de nal-CRO, ou 5 ,mg/kg/jour de caspofungine, ou 5 ,mg/kg/jour de fluconazole, ou 50 ,mg /kg/jour de terbinafine, ou 30 ,mg/kg/jour d'isavuconazonium, ou 30 ,mg/kg/jour de micafungine par injection sous-cutanée 1 ,h avant *C. défi glabrata*. La survie des souris a été observée pendant 10 jours.

Analyse statistique {#S0002-S2015}

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L'analyse statistique a été réalisée avec GraphPad Prism (Version 5.0). Une analyse de variance à un facteur (ANOVA) avec les tests post hoc de Dunnett a été utilisée pour déterminer la différence entre le contrôle et chaque traitement. La signification statistique a été déterminée par *P* <, ,0,05.

Résultats {#S0003}

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Nal-CRO a inhibé efficacement la croissance de *C. glabrata* {#S0003-S2001}

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Pour évaluer le potentiel de nal-CRO à contrôler *C. glabrata*, l'activité antifongique du nal-CRO contre *C. glabrata* a d'abord été évalué à l'aide d'un essai en damier *in vitro*. La concentration minimale inhibitrice (CMI) de nal-CRO par rapport à *C. glabrata* était de 0,25 ,μg/mL. Nal-CRO a montré une valeur de CMI inférieure à celle du nal-PEN à 0,25 ,μg/mL. De plus, la thérapie combinée nal-CRO a présenté un effet synergique, comme le montre l'indice de concentration inhibitrice fractionnaire (FICI) ([Figure 1](#F0001)A). La concentration bactéricide minimale (CMB) de nal-CRO contre *C. glabrata* était de 16 ,μg/mL. Nal-CRO a montré une valeur MBC inférieure à celle du nal-PEN à 16 ,μg/mL. Une thérapie combinée nal-CRO a présenté un effet additif, comme le montre le FICI ([Figure 1](#F0001)B). Ces résultats ont démontré que le nal-CRO a une forte activité antifongique *in vitro* et a augmenté de manière synergique l'effet antifongique du nal-PEN.10.1080/21505594.2018.1528842-F0001Figure 1.*Activité antifongique in vitro* et *in vivo* du nal-CRO . (A) Nal-CRO a présenté un effet synergique sur l'interaction de nal-PEN avec *C. glab


Voir la vidéo: 3406B CAT. Too much fuel consumption and produce white smoke?